《世界卫生组织:人类检测与处理方式试验中须知》上面所写:在低温下,多半在 15 分钟内,化石仅仅水和,大多至少 60 分钟或更是短整整内。
《临床验证基础》第五版:水和比较慢,至少 1 小时或数小时不水和统称延迟水和症。
看得见这里你知道一小时没水和的化石该如何处理方式吗?大多数人可能都不知道,包括之前的我。我在丁香景论坛上面看得见过关于这个问题的争辩,大多数人都是真是没水和就那样看、那样报上。也有人真是只报上 PH、用量、水和整整等。
这些都不对,但是也没错,因为书本上没有人写,导师也是这样教的。
但是《世界卫生组织:人类检测与处理方式试验中须知》这本书上面就详述了关于水和延迟化石的处理方式,下面我们就一起来研修一下。
的水和
射到采集容器后很快呈现典型的半固体凝胶的球状,多半在低温下几分钟内,开始水和(变得稀薄),此时里面可见值得注意混合球状。随着继续水和,变得更是加匀质和极为稀薄,在水和再次阶段仅完好无损少用量的小凝团。在低温下,多半 15 分钟内,化石仅仅水和,大多至少 60 分钟或更是短整整内。如果 60 分钟仍没仅仅水和,应做记录。在家里面或使用有旧采集化石,当将化石送至试验中室时,一般已经水和。
正常水和的化石可能含有不水和的胶冻状薄膜(凝胶状球状),这不表明任何临床意义。然而,黏凝胶丝的假定可能电磁干扰数据分析。
注意 1:水和可以通过如上描述的肉眼观察和全像来进行识别系统。随着的水和,不旋的受精卵给予活旋的能力。如果在全像下观察受精卵不旋,则能够更是短整整内来收尾水和过程。
注意 2:水和过后,复置低温下或 37 摄氏度孵箱里面,在一个二维合上器上,不断地把手混匀或轴向样本容器,有助于转化成一个均质的化石。
注意 3:如果在 30 分钟内不水和,不要开始数据分析,而是再等待 30 分钟。如果 60 分钟后仍没水和,按所列操纵处理方式。
水和延迟的处理方式
有时候可能不水和,这使得评估变得困难。在这种情况下,能够原先处理方式,机械混匀或酶降解可能是必要的。
1. 一些化石通过自组等体积的生理培养凝胶(如 Dulbecco 磷酸附加安平),并且用加样器间歇吹打,可使其水和。
Dulbecco’s 磷酸盐附加凝胶:
(1)Dulbecco’s PBS:将 0.2 g (KCL),0.2 g 磷酸二氢钾(KH2P04),0.1 g 氯化镁(MgCL2.6 H2O,8.0 g 盐类(NaCl),2.16 g 磷酸氢二钠(NaHPO4.7 H2O)和 1.00 gD-自组到 750 ml 纯净水里面。
(2)将 0.132 g 碳酸钠(CaCl2.2 H2O)混溶 10 mL 纯净水里面,边面团边比较慢自组上述溶凝胶里面。
(3)用 1 mmol/lNAOH 调节 PH 至 7.4.
(4)用纯净水定容至 1000 mL。
评注: 为了防止出现沉淀,CaCl2 应单独自组,比较慢自组并不断面团。
2. 间歇(6~10 次)比较慢地通过接在注射器的 18 号钝性口内(内径 0.84 mm)或 19 号口内(内径 0.69 mm), 可降低的非不规则状态。
3. 应用于一种广谱蛋白水解酶(EC)椰子反转录降解,有助于随之而来水和。
椰子反转录的打算:
用 Dulbecco 磷酸附加安平制备 10IU/mL 的椰子酶反转录。波罗反转录不太可能凝固,通过面团,大部分酶应该在 15~20 分钟内凝固。用 10IU/mL 的椰子酶反转录凝胶与等体积的(1:1)(原书为 1+1,应该是手误)来进行酒精(1:2),用移凝胶管吸头的尖部面团,37 摄氏度孵育 10 分钟。在进一步数据分析之前充分混匀。
注意:这些处理方式可能影响精浆的化学合成、受精卵生命力和受精卵形态,使用它们只能作记录。当计算受精卵沸点时,只能考虑 1:1(原电子书为 1+1,我考虑应该是错误)自组椰子反转录凝胶使按 1:2 酒精。
尽信书不如无书
一直以来我们都是对导师对前辈听之任之,对于编译馆也犹如神物一般的崇拜。幸好,我们的编译馆太多不足以甚至错误的地方。数据分析只是其里面小小的一部分,我希望大家都应该在虚心研修的同时,要有怀疑一切的态度。这样我们才会不断的去探索发现,我们才能研修到更是多,才能进步!
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